0
г. Москва, Годовикова 9, стр 12, подъезд 12.1, этаж 1, пом. 1.4
order@belbiolab.ru
Остались вопросы?
Закажите звонок и наш менеджер свяжется с нами
/ПЦР смесь 5Х Fast Probe qPCR Mastermix
ПЦР смесь 5Х Fast Probe qPCR Mastermix
детекция результатов ПЦР в режиме реального времени (ПЦР-РВ)
р.
р.
5Х Fast probe qPCR Mastermix — универсальная "ready to use" смесь для количественной ПЦР с флуоресцентными зондами, которая содержит необходимые компоненты, в том числе Taq ДНК-полимеразу с "горячего стартом" в реакционном буфере. 5Х Fast Probe qPCR Mastermix оптимизирован для зондов гидролиза ДНК/LNA на основе 5'-3'экзонуклеазной активности. Taq ДНК-полимераза активируется 2-минутным этапом инкубации при 95°C. Это предотвращает удлинение неспецифических отожженных праймеров и димеров-праймеров, образующихся при низких температурах во время настройки ПЦР. 5X Fast Probe qPCR Mastermix состоит из следующих компонентов:
- термостабильная Taq ДНК-полимераза с "горячим стартом";
- дезоксинуклеозидтрифосфаты;
- Mg++
- оптимизированный буфер.
- термостабильная Taq ДНК-полимераза с "горячим стартом";
- дезоксинуклеозидтрифосфаты;
- Mg++
- оптимизированный буфер.
Преимущества:
•Высокая чувствительность реакции вплоть до единичных копий ДНК
•Повышенная устойчивость к ингибиторам
Область применения
•Высокочувствительная ПЦР
•ПЦР с флуоресцентными зондами
•Мультиплексная ПЦР
•Рутинная ПЦР
Рекомендации к использованию:
Допускается 10 циклов заморозки/разморозки.
Условия хранения и транспортировки:
●От -24°С до -16°С – 1 год
•Высокая чувствительность реакции вплоть до единичных копий ДНК
•Высокая чувствительность реакции вплоть до единичных копий ДНК
•Повышенная устойчивость к ингибиторам
Область применения
•Высокочувствительная ПЦР
•ПЦР с флуоресцентными зондами
•Мультиплексная ПЦР
•Рутинная ПЦР
Рекомендации к использованию:
Допускается 10 циклов заморозки/разморозки.
Условия хранения и транспортировки:
●От -24°С до -16°С – 1 год
•Высокая чувствительность реакции вплоть до единичных копий ДНК
ОПИСАНИЕ ПРОДУКТА
5x Fast Probe qPCR Mastermix представляет собой готовую к использованию смесь для количественной и/или качественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (далее ПЦР-РВ)
В состав 5X Fast Probe qPCR Mastermix входят следующие компоненты:
В состав 5x Fast Probe qPCR Mastermix входит инактивированная ДНК-полимераза TaqA, которая не обладает ферментативной активностью в условиях приготовления ПЦРсмеси, что приводит к повышению специфичности и чувствительности реакции. Активация фермента происходит в процессе первого цикла денатурации ДНК при температуре выше 40 С.
5x Fast Probe qPCR Mastermix обеспечивает проведение мультиплексных ПЦР-РВ (до 4 одновременно-детектируемых мишеней). При постановке мультиплексных реакций рекомендуется оптимизация количества олигонуклеотидов и зонда для каждой мишени.
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
СТАНДАРТНЫЙ ПРОТОКОЛ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
Для уменьшения ошибки пипетирования при постановке нескольких параллельных реакций рекомендуется приготовить общий ПЦР-премикс, содержащий все компоненты смеси (зонд, воду, 5x Fast Probe qPCR Mastermix и праймеры) за исключением ДНКматрицы. Объем ПЦР-премикса рассчитывается исходя из числа реакций с запасом на одну пробу. После того, как аликвоты ПЦР-премикса будут внесены в предварительно промаркированные ПЦР-пробирки, в них добавляют соответствующую ДНК-матрицу.
В зависимости от особенностей используемой ДНК-матрицы и задач исследования, состав реакционной смеси может быть оптимизирован:
- оптимальная концентрация праймеров может находиться в диапазоне 0,05–1 мкМ;
- на одну реакцию объемом 25 мкл рекомендуется использовать 1 пг – 10 нг плазмидной, фаговой или бактериальной ДНК; 0,1–100 нг геномной эукариотической ДНК.
Рекомендуется дополнительно включать в анализ NTC (no template control) – реакцию, содержащую все компоненты реакции кроме ДНК-матрицы.
Допускается использование праймеров и зондов с другой начальной концентрацией. Рекомендуемый объем ПЦР-смеси для одной реакции – 25 мкл. Однако при необходимости объем реакционной смеси может быть изменен с сохранением конечной концентрации входящих в нее компонентов.
3. Аккуратно перемешать реакционную смесь и осадить капли со стенок пробирки.
4. Провести ПЦР согласно таблице 2
Таблица 2. Рекомендуемые условия амплификации для ПЦР в «реальном времени»
Буфер для хранения и разведения: 20 мм Трис-HCl ($pH8,0$); 100 мМ КСІ; 0,5 ММ ЭДТА; 50% глицерин; 0,5% Tween-20.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ
Смотреть
Скачать
5x Fast Probe qPCR Mastermix представляет собой готовую к использованию смесь для количественной и/или качественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (далее ПЦР-РВ)
В состав 5X Fast Probe qPCR Mastermix входят следующие компоненты:
- термостабильная ДНК-полимераза TaqA с «горячим стартом» (#E-TAP-50, БелБиоЛаб)
- дНТФ
- Ацетат (конечная концентрация в реакционной смеси 5 мМ)
- оптимизированный буфер
В состав 5x Fast Probe qPCR Mastermix входит инактивированная ДНК-полимераза TaqA, которая не обладает ферментативной активностью в условиях приготовления ПЦРсмеси, что приводит к повышению специфичности и чувствительности реакции. Активация фермента происходит в процессе первого цикла денатурации ДНК при температуре выше 40 С.
5x Fast Probe qPCR Mastermix обеспечивает проведение мультиплексных ПЦР-РВ (до 4 одновременно-детектируемых мишеней). При постановке мультиплексных реакций рекомендуется оптимизация количества олигонуклеотидов и зонда для каждой мишени.
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
- Мультиплекс ПЦР-РВ
- Рутинная ПЦР
- Низкокопийная ПЦР
- ПЦР-РВ с Taqman-дизайном зондов
СТАНДАРТНЫЙ ПРОТОКОЛ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
Для уменьшения ошибки пипетирования при постановке нескольких параллельных реакций рекомендуется приготовить общий ПЦР-премикс, содержащий все компоненты смеси (зонд, воду, 5x Fast Probe qPCR Mastermix и праймеры) за исключением ДНКматрицы. Объем ПЦР-премикса рассчитывается исходя из числа реакций с запасом на одну пробу. После того, как аликвоты ПЦР-премикса будут внесены в предварительно промаркированные ПЦР-пробирки, в них добавляют соответствующую ДНК-матрицу.
- Перед использованием разморозить и перемешать все компоненты ПЦР-смеси
- Приготовить реакционную смесь согласно таблице 1. Количество вносимых компонентов приведено для одной реакции объемом 25 мкл.
Компонент | Объём, мкл | Конечная концентрация |
5X Fast-probe qPCR Mastermix | 5 | 1-кратный |
Прямой праймер, 10 мкМ | 0,5-1 | 0,2 – 0,4 мкМ |
Обратный праймер, 10 мкМ | 0,5-1 | 0,2 – 0,4 мкМ |
Зонд, 10 мкм | 0,25-0,7 | 0,1 – 0,28 мкМ |
ДНК-матрица | Определяет пользователь | 0,1 – 250 нг |
Н2О свободная от нуклеаз | Довести объем реакционной смеси до 25 мкл. | |
В зависимости от особенностей используемой ДНК-матрицы и задач исследования, состав реакционной смеси может быть оптимизирован:
- оптимальная концентрация праймеров может находиться в диапазоне 0,05–1 мкМ;
- на одну реакцию объемом 25 мкл рекомендуется использовать 1 пг – 10 нг плазмидной, фаговой или бактериальной ДНК; 0,1–100 нг геномной эукариотической ДНК.
Рекомендуется дополнительно включать в анализ NTC (no template control) – реакцию, содержащую все компоненты реакции кроме ДНК-матрицы.
Допускается использование праймеров и зондов с другой начальной концентрацией. Рекомендуемый объем ПЦР-смеси для одной реакции – 25 мкл. Однако при необходимости объем реакционной смеси может быть изменен с сохранением конечной концентрации входящих в нее компонентов.
3. Аккуратно перемешать реакционную смесь и осадить капли со стенок пробирки.
4. Провести ПЦР согласно таблице 2
Таблица 2. Рекомендуемые условия амплификации для ПЦР в «реальном времени»
Этап | Температура, °C | Время, сек | Кол-во циклов |
Начальная денатурация | 95 | 120 | 1 |
Денатурация | 95 | 5 | 40-50 |
Отжиг праймеров | 60 | 15 | |
Элонгация | 72 | 15 |
Буфер для хранения и разведения: 20 мм Трис-HCl ($pH8,0$); 100 мМ КСІ; 0,5 ММ ЭДТА; 50% глицерин; 0,5% Tween-20.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ
- Транспортировка допускается до 14 дней при температуре не выше 4-8°С
- Срок годности при соблюдении условий хранения: год с даты производства при температуре от -24°С до -16°С.
- Допускается заморозка/оттаивание 5X Fast-Probe qPCR Mastermix не более 10 раз.
- Рекомендуется приготовить аликвоты 5X Fast-Probe qPCR Mastermix Mastermix удобного объема для однократного использования.
Кат. номер | Кол-во реакций | Кол-во реагента в пробирке | |
M5-FP | M5-FP-0.25 | 50 | 0,25 мл (1*0,25) |
M5-FP-0.5 | 500 | 2,5 мл (2*1,25) | |
M5-FP-1 | 1 000 | 5 мл (4*1,25) | |
M5-FP-5 | 5 000 | 25 мл (20*1,25) | |
M5-FP-10 | 10 000 | 50 мл (1*50) | |
M5-FP-50 | 50 000 | 250 мл (5*50) | |
Смотреть
Скачать
Почему нам доверяют
БелБиоЛаб — молодая биотехнологическая компания, разработчик и производитель реагентов для научных исследований, основана в 2015 году!
Миссия компании заключается в производстве различных ферментов и реакционных буферов для генной инженерии, молекулярной биологии, лабораторной диагностики. Наши ферменты обладают устойчивостью к ингибиторам, высоко чувствительны к широкому спектру матриц (единичные копии РНК/ДНК в реакции), могут быть использованы в производстве диагностических тест-систем. Помимо этого, в наш каталог входят мастермиксы и дополнительные реактивы, предназначенные для различных видов ПЦР, а также наборы для выделения нуклеиновых кислот и синтеза кДНК.
С 2022 года мы поставляем импортные реактивы, лабораторное оборудование и расходные материалы от известных мировых брендов как для своего производства, так и для крупных коммерческих компаний-производителей, научно-исследовательских институтов, специализированных лабораторий.
Миссия компании заключается в производстве различных ферментов и реакционных буферов для генной инженерии, молекулярной биологии, лабораторной диагностики. Наши ферменты обладают устойчивостью к ингибиторам, высоко чувствительны к широкому спектру матриц (единичные копии РНК/ДНК в реакции), могут быть использованы в производстве диагностических тест-систем. Помимо этого, в наш каталог входят мастермиксы и дополнительные реактивы, предназначенные для различных видов ПЦР, а также наборы для выделения нуклеиновых кислот и синтеза кДНК.
С 2022 года мы поставляем импортные реактивы, лабораторное оборудование и расходные материалы от известных мировых брендов как для своего производства, так и для крупных коммерческих компаний-производителей, научно-исследовательских институтов, специализированных лабораторий.
Вы можете протестировать нашу продукцию и заказать тестовые образцы прямо сейчас!
Если вам необходимо получить полную информацию о ценах на продукцию, то вы можете сделать это, нажав на кнопку
Собственные площади для производства, новейшее оборудование
Оптимизация состава под нужды заказчика, подготовка к лиофилизации
Безопасная и оперативная доставка заказов
по всей России
по всей России