Мастер-микс для ПЦР 2X Fast Dye U — универсальный готовый к использованию реагент для полимеразной цепной реакции с интеркалирующим красителем Eva Green, УДГ (UDG), dNTP+ dUTP с детекцией в режиме реального времени. Мастер-микс содержит вещества, которые увеличивают время работы и процессивность Taq ДНК-полимеразы за счет повышения ее стабильности во время ПЦР.
Наличие dUTP в реакционной смеси приводит к тому, что все продукты амплификации будут содержать в своем составе урацил. При этом UDG эффективно гидролизует урацил из одно- и двухцепочечных молекул ДНК во время постановки реакции, предотвращая, таким образом, амплификацию продуктов предшествующих ПЦР (ампликонов), что позволяет избежать получения ложноположительных результатов. UDG инактивируется во время первого цикла денатурации ДНК и не препятствует амплификации продуктов текущей реакции.
Мастер-микс для ПЦР 2X Fast Dye U содержит ДНК-полимеразу, которая инактивирована антителами и не проявляет ферментативной активности во время приготовления реакционной смеси. Это приводит к повышению специфичности и чувствительности реакции. Активация фермента происходит во время первого цикла денатурации ДНК и запускается автоматически. По запросу мастер-микс может содержать референсный краситель ROX (в зависимости от прибора для количественной ПЦР конечная концентрация составляет 0,5 мкМ (High ROX) или 0,03 мкМ (Low ROX)).