РНАзин H

Ингибитор РНКаз РНАзин H — это рекомбинантный белок человеческого происхождения с молекулярной массой 50 kDa, продуцируемый бактериями Escherichia coli в промышленных масштабах. Ингибитор способен подавлять активность рибонуклеаз (РНКаз), таких как РНКаза A, B и C путём нековалентного связывания в соотношении 1:1 с высокой степенью аффинности. Также показано, что он не эффективен против РНКазы 1, РНКазы T1, нуклеазы S1, РНКазы H или РНКаз грибов из рода Aspergillus. Кроме того, при использовании ингибитора РНКаз с Taq ДНК-полимеразой и обратной транскриптазой не наблюдается подавления их активности. Поскольку рибонуклеазы обычно сохраняют активность в денатурирующих условиях, необходимо соблюдать осторожность, чтобы избежать денатурации молекул ингибитора РНКазы, образовавших комплекс с рибонуклеазой. Чтобы предотвратить высвобождение активной РНКазы, следует избегать температур выше 55 °C и высоких концентраций денатурирующих агентов. Из-за генетической модификации ингибитор РНКаз РНАзин H не содержит пары цистеинов, которые имеются в нативной форме этого человеческого белка, которая очень чувствительна к окислению, что приводит к потере функции. В результате ингибитор РНКаз РНАзин H значительно улучшил устойчивость к окислению по сравнению с нативным ингибитором РНКаз человека и стабилен при низких концентрациях DTT. Это делает его идеальным для реакций, где высокая концентрация DTT неблагоприятна для реакции (например, ОТ-ПЦР в реальном времени).