Набор PuriSpin S для выделения нуклеиновых кислот

Преимущества:
• Выход продукта >75%

Область применения:
• Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Условия хранения и транспортировки:
• От +2°C до +24°C - 1 год
• От +24°C до +37°C - 5 дней

Состав набора:
MiniSpin колонки
100 шт.
Собирательные пробирки
300 шт.
Буфер для лизиса SSL
2 банки по 50 мл
Промывочный буфер SSW
2 банки по 65 мл
Буфер для элюции SFE
1 банка - 12 мл

ОПИСАНИЕ ПРОДУКТА
Набор для тотального выделения ДНК/РНК PuriSpin S предназначен для выделения РНК и ДНК из различных типов образцов: мазков и соскобов слизистых оболочек мочеполовых путей, дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта; гомогенизированных образцов тканей и образцов биологических жидкостей (мочи, секрета предстательной железы, сыворотки, плазмы, спиномозговой жидкости) человеческого и животного происхождения для последующих исследований методами ПЦР и ОТ-ПЦР, включая получение результатов в режиме реального времени.

Таблица 1. Содержимое набора для полного выделения ДНК/РНК PuriSpin S


УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ
При +4 - +25 °С - 1 год
Условия транспортировки: +4 - +25 °С.

ВНИМАНИЕ! При работе с реактивами в составе набора для выделения ДНК/РНК PuriSpin S необходимо соблюдать стандартные меры безопасности, рекомендуется все манипуляции проводить квалифицированному лабораторному персоналу!

НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
– Одноканальные пипетки переменного объема (10–1 000 мкл);
– Наконечники для пипеток с фильтрами, не содержащие нуклеаз;
– Ламинарный бокс;
– Дисмембратор;
– Настольная центрифуга с угловым ротором для пробирок объемом 1,5–2 мл (RCF ≥ 10 000 × g);
– Твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5–2;
– Холодильник с морозильной камерой;
– Одноразовые перчатки;
– Контейнер для биологически опасных отходов;
– Набор для дезинфекции рабочей станции.

ВНИМАНИЕ! При работе с реактивами в составе набора для выделения ДНК/РНК PuriSpin S необходимо соблюдать стандартные меры безопасности, рекомендуется все манипуляции проводить квалифицированному лабораторному персоналу!

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Образцы РНК/ ДНК можно хранить в течение 1 месяца при температуре –24 до –16 °C или в течение 1 года при температуре ниже –80 °C.

ПРОЦЕДУРА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НАБОРА
Приготовление образцов
Помещают образцы в пробирки с подходящей средой для транспортировки. Немедленно выделяют ДНК/РНК из образцов или замораживают образцы при температуре от –20 до –80 °C.

Для образцов мочи требуется предварительная обработка: рекомендуется центрифугировать 1,5мл мочи при скорости 10 000 об/мин, отбросить надосадочную жидкость и ресуспендировать осадок в 90мкл буфера ТЕ или 0,9% растворе NaCl. Для приготовления экстракта ткани рекомендуется приготовить 10 % (масс./об.) суспензию ткани в 1 мл 0,9 % раствора NaCl или PBS с добавлением стеклянных шариков, а затем гомогенизировать образец в течение 3 мин при энергичном встряхивании на дисмембраторе и центрифугировать в течение 5 мин при максимальной скорости (10 000–14 000 об/мин). Надосадочную жидкость можно использовать для последующего выделения нуклеиновых кислот.

Все остальные образцы следует тщательно гомогенизировать путем перемешивания на вортексе непосредственно перед выделением ДНК/РНК.

НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

Процедура выделения ДНК/РНК

1. Если раствор SSL содержит осадок, его следует растворить путем нагревания до 65 °С.
2. В каждую стерильную одноразовую пробирку добавляют до 10 мкл экзогенного внутреннего контроля (ЭВК), если он предоставлен для анализа данного инфекционного агента.
3. Добавляют 500 мкл буфера SSL. Если планируется выделить РНК/ДНК из 100 образцов в течение одного цикла, рекомендуется добавить весь объем смеси ЭВК во флакон с буфером SSL.
4. В каждую пробирку добавляют 100 мкл образца.
5. В пробирку с отрицательным контролем выделения (ОКВ) добавляют 100 мкл буфера SFE.
6. Плотно укупоривают крышками, перемешивают пробирки на вихревой мешалке, инкубируют при 65 °C в течение 10 мин и еще раз перемешивают на вихревой мешалке.
7. Центрифугируют все пробирки при 10 000 g в течение 5 мин.
8. Помещают центрифужную колонку в пробирку для сбора образцов объемом 2 мл . Наносят надосадочную жидкость на колонку, не касаясь осадка.
9. Центрифугируют колонку при 10 000 g в течение 1 мин. Помещают центрифужную колонку в новую пробирку для сбора образцов объемом 2 мл .
10. Наносят 500 мкл буфера SSL на колонку.
11. Центрифугируют колонку при 10 000 g в течение 1 мин. Отбрасывают фильтрат.
12. Наносят 650 мкл буфера SSW на колонки. Центрифугируют колонку при 10 000 g в течение 1 мин. Отбрасывают фильтрат.
13. Повторяют п. 12.
14. Помещают центрифужную колонку в новую пробирку для сбора образцов объемом 2 мл. Центрифугируют при 10 000 g в течение 3 мин.
15. Помещают центрифужные колонки в чистую пробирку объемом 1,5 мл (не предоставлена).
16. Добавляют 50–100 мкл буфера SFE. Инкубируют при комнатной температуре в течение не менее 1 мин.
17. Центрифугируют при 10 000g в течение 1 мин.
18. Отобрать нуклеиновые кислоты содержащиеся в супернатанте.

Только для исследовательской работы. Товар не предназначен для медицинских целей!

Смотреть
Скачать