Урацил-ДНК-гликозилаза — это фермент, катализирующий гидролиз N-гликозильной связи между урацилом и сахарным остатком в одно- и двуцепочечных ДНК при наличии в цепи остатков дУТФ. Фермент проявляет максимальную активность при температуре 37 °C.

Урацил-ДНК-гликозилаза применяется при приготовлении ПЦР смесей для предотвращения появления ложноположительных результатов, вызванных контаминацией реакционной ПЦР-смеси продуктами ранее выполненной ПЦР (ампликонами), которые разрушаются перед амплификацией.
Фермент не проявляет активности в отношении РНК и коротких олигонуклеотидов. Фермент полностью инактивируется в процессе первого цикла денатурации ДНК и не препятствует амплификации продуктов текущей реакции.